? ? ? ? ? ?薄層層層析的原理:薄層層析是把支持物均勻涂布于支持板(常用玻璃板等等)上形成薄層,然后用相應(yīng)的溶劑進(jìn)行展開。薄層層析可根據(jù)作為固定相的支持物不同,分為薄層吸附層析(吸附劑)、薄層分配層析(纖維素)、薄層離子交換層析(離子交換劑)、薄層凝膠層析(分子篩凝膠)等。一般實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用較多的是以吸附劑為固定相的薄層吸附層析。
? ? ? ? ? ?固定相支持劑的選擇和處理:在薄層層析時(shí),對(duì)支持劑的選擇主要考慮兩方面:一是支持劑的性質(zhì)與適用范圍,二是支持劑的顆粒大小,一般來說,所選吸附劑應(yīng)具有大的比表面積和足夠的吸附能力,吸附劑對(duì)欲分離的不同物質(zhì)應(yīng)有不同的吸附能力,既有足夠的分辨力,所選吸附劑與溶劑及樣品組分不會(huì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng),吸附力的強(qiáng)弱規(guī)律可概況如下:吸附力與兩相間界面張力的降低成正比,某物質(zhì)溶液中被吸附的程度與其在溶劑中的溶解度成反比,極性吸附劑易吸附極性物質(zhì),非極性吸附劑易吸附非極性物質(zhì),同組化合物的吸附程度有一定的變化方向,例如,同系物極性遞減,而被非極性表面吸附的能力將遞增。
? ? ? ? ? ? 薄層層析法的發(fā)展:薄層層析法由于其本身所具有的許多優(yōu)點(diǎn),幾十年來,在混合物的分離、定性及定量分析中的應(yīng)用相當(dāng)普遍,并逐漸取代了紙層析分離技術(shù),為了克服薄層層析法存在的某些不足,獲得更有效的分離效果,在薄層制備、展開方式、分析鑒定手段以及相配套的儀器設(shè)備等方面近年來進(jìn)行了許多革新,其中根本的是支持劑的改進(jìn),以一種直徑更小的支持劑顆粒替代常規(guī)的支持劑所制備的薄層,比常規(guī)的薄層具有所需樣品少,展開速率快、距離短、分辨力高等優(yōu)點(diǎn),而且此種新型的薄層具有較好的光學(xué)特性,更有利于對(duì)分離斑點(diǎn)進(jìn)行光密度掃描。為了區(qū)別于常規(guī)的薄層層析分析法,通常將此種方法稱為高效薄層層析法。