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反相柱與正相柱的區(qū)別

正相柱和反相柱源于柱上固定相與流動(dòng)相之間極性的對(duì)比。若固定相極性大于流動(dòng)相，為正相柱，反之，為反相柱，通常反相柱應(yīng)用較多。

　　現(xiàn)在一般都用反相柱，正相在樣品中對(duì)水敏感等特殊情況下才使用。正相的固定性是極性的，流動(dòng)相是非極性的，適于分離強(qiáng)極性物質(zhì)。反相的固定性是非極性的，流動(dòng)相是極性的，適于分離弱極性物質(zhì)。

　　二者本質(zhì)上是填料(固定相)的不同,正相色譜柱填料極性強(qiáng),洗脫順序由弱到強(qiáng)；反相柱填料極性弱，洗脫順序由強(qiáng)到弱。

　　1.正相柱固相相通常為硅膠（Silica）以及其他具有極性官能團(tuán)氨基團(tuán)，如（NH2，APS）和氰基團(tuán)（CN，CPS）的鍵合相填料。

　　由于硅膠表面的硅羥基（SiOH）或其他極性基團(tuán)極性較強(qiáng)，因此，分離的次序是依據(jù)樣品中各組分的極性大小，即極性較弱的組份先被沖洗出色譜柱。正相色譜使用的流動(dòng)相極性相對(duì)比固定相低，如正已烷（Hexane），二氯甲烷（Methylene Chloride）等。

　　2.反相柱固定相通常是以硅膠為基質(zhì)，表面鍵合有極性相對(duì)較弱官能團(tuán)的鍵合相。反相色譜所使用的流動(dòng)相極性較強(qiáng)，通常為水、緩沖液與甲醇、乙腈等的混合物。樣品流出色譜柱的順序是極性較強(qiáng)的組分先被沖洗出，而極性弱的組分會(huì)在色譜柱上有更強(qiáng)的保留。

常用的反相填料有：C18（ODS）、C8（MOS）、C4（Butyl）、C6H5（Phenyl）等。

常用的正相填料有：Silica（硅膠）、NH2（氨基）、APS、CN 、CPS等。

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